(Цитометрија на проток, FCM) е клеточен анализатор кој го мери интензитетот на флуоресценција на витражните маркери на клетките. Тоа е високо-технолошка технологија развиена врз основа на анализа и сортирање на единечни клетки. Може брзо да ја мери и класифицира големината, внатрешната структура, ДНК, РНК, протеините, антигени и други физички или хемиски својства на клетките и може да се заснова на собирање на овие класификации.
Цитометар на проток главно се состои од следниве пет дела:
1 комора за проток и систем на флуидици
2 ласерски извор на светлина и систем за обликување на зраци
3 Оптички систем
4 електроника, систем за складирање, дисплеј и анализа
5 систем за сортирање на ќелии
Меѓу нив, ласерската побудување во ласерскиот извор на светлина и системот за формирање на зрак е главното мерење на сигналите на флуоресценција во цитометрија на проток. Интензитетот на побудувањето на светлината и времето на изложеност се поврзани со интензитетот на сигналот за флуоресценција. Ласер е кохерентен извор на светлина што може да обезбеди еднократна должина, високо-интензитет и осветлување со висока стабилност. Тоа е идеален извор на побудување за да се исполнат овие барања.
Постојат две цилиндрични леќи помеѓу ласерскиот извор и комората на проток. Овие леќи се фокусираат на ласерски зрак со кружен пресек што се испушта од ласерскиот извор во елипсовиден зрак со помал пресек (22 μm × 66 μm). Ласерската енергија во рамките на овој елипсовиден зрак се дистрибуира според нормална дистрибуција, обезбедувајќи постојан интензитет на осветлување за клетките што минуваат низ областа за откривање на ласер. Од друга страна, оптичкиот систем се состои од повеќе групи на леќи, дупки и филтри, кои можат грубо да се поделат во две групи: низводно и низводно од комората на проток.
Оптичкиот систем пред комората на проток се состои од леќи и дупки. Главната функција на леќите и шалчето (обично две леќи и шалче) е да се фокусира ласерскиот зрак со кружен пресек што го испушта ласерскиот извор во елипсовиден зрак со помал пресек. Ова ја дистрибуира ласерската енергија според нормална дистрибуција, обезбедувајќи постојан интензитет на осветлување за клетките низ областа на откривање на ласер и минимизирање на мешање од залутана светлина.
Постојат три главни типа на филтри:
1: Филтер за долг премин (LPF) - Само овозможува светлина со бранови должини повисоки од одредена вредност да помине.
2: Краток премин филтер (SPF) - Само овозможува светлина со бранови должини под одредена вредност да помине.
3: Филтер за опсег (BPF) - Само овозможува светлина во специфичен опсег на бранова должина да помине.
Различни комбинации на филтри можат да ги насочат сигналите за флуоресценција на различни бранови должини до индивидуалните цевки за фотомилптиптор (PMT). На пример, филтрите за откривање на зелена флуоресценција (FITC) пред PMT се LPF550 и BPF525. Филтрите што се користат за откривање на портокалово-црвена флуоресценција (PE) пред PMT се LPF600 и BPF575. Филтрите за откривање на црвена флуоресценција (CY5) пред PMT се LPF650 и BPF675.
Цитометријата на проток главно се користи за сортирање на клетки. Со напредокот на компјутерската технологија, развојот на имунологијата и пронајдокот на моноклонална технологија на антитела, неговите апликации во биологијата, медицината, аптеката и другите полиња стануваат се повеќе распространети. Овие апликации вклучуваат анализа на динамика на клетките, апоптоза на клетките, пишување клетки, дијагностицирање на тумори, анализа на ефикасност на лекови, итн.
Време на објавување: Сеп-21-2023
